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產品分類
Product Category詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
|---|---|---|---|
| 分子式 | / | 純度 | / |
| 分子量 | / | 貨號 | AC19L021/AC19L022 |
| 規格 | 100T/10*100T | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。 | 應用領域 | 生物產業 |
產品描述
螢火蟲熒光素酶是一種分子量約為61 kD 的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化Luciferin 氧化成Oxyluciferin，在Luciferin 氧化的過程中，會發出生物熒光(Bioluminescence)。海腎熒光素酶是一種分子量約為36 kD的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化Coelenterazine 氧化成Coelenteramide，在Coelenterazine 氧化的過程中也會發出生物熒光。生物熒光可以通過化學發光儀(Luminometer)或液閃測定儀進行測定。
在 DLR 檢測中，螢火蟲（Firefly）熒光素酶和海腎（Renilla）熒光素酶的活性可在單個樣品中依次檢測。先是先以熒光素(Luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)，后以腸腔素(Coelenterazine)為底物來檢測海腎熒光素酶(Renilla Luciferase)，并在后續加入海腎熒光素酶底物時，同時加入抑制螢火蟲熒光素酶催化Luciferin發光的物質，使后續檢測僅僅檢測到海腎熒光素酶的活性，實現雙熒光素酶報告基因檢測。通過熒光素酶和其底物這一生物發光體系，可以非常靈敏、高效地檢測基因的表達。通常把感興趣基因的轉錄調控元件或5' 啟動子區克隆在Luciferase 的上游，或把3'-UTR 區克隆在Luciferase 的下游等，構建成報告基因(Reporter Gene)質粒，然后轉染細胞，用適當藥物等處理細胞后裂解細胞，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低來判斷藥物處理等對目的基因的轉錄調控作用。 Renilla Luciferase 相對更多地被用作轉染效率的內參，以消除細胞數量和轉染效率的差異。
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣，無細胞內源活性干擾等特點。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L021 | 100 T |
Firefly & Renilla雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒 | AC19L022 | 10*00 T |
試劑盒組分
組份 | AC19L021（100T） | AC19L022（10*00T） |
A.5× Passive Luciferase Lysis Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
B.Firefly Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
C.D-Luciferin | 2 mg | 10*2 mg |
D.Renilla Luciferase Assay Buffer | 10 mL | 10*10 mL |
E.50× Coelenterazine | 200 µL | 10*200 uL |
保存方法
藍冰運輸。-20℃保存，有效期12個月。
【注】：C組分建議預先使用B組分配制為2 mg/mL儲液，B組分、D組分及配制為儲液的C組分，根據實驗需求進行小批量分裝。所有檢測工作液建議現配現用，避免反復凍融。
注意事項
1. 為取得最佳測定效果，在用單管的化學發光儀測定時，樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應盡量控制一致；使用具有化學發光測定功能的多功能熒光酶標儀時，宜先把樣品全部加好，然后統一加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑。
2. 由于溫度對酶反應有影響，所以測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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